|
|
Neurosteroid effects on neuronal network activity in vitro.
Strnadová, Lenka ; Smejkalová, Terézia (vedoucí práce) ; Heleš, Mário (oponent)
GABA receptory typu A (GABAAR) jsou ligandem řízené iontové kanály propustné pro chloridové anionty. V savčím mozku zprostředkovávají většinu inhibiční neurotransmise a poruchy v GABAergním systému mají za následek řadu neurologických poruch, jakými jsou epilepsie, úzkosti a deprese. Neurosteroidy jsou metabolity cholesterolu, které účinkují na řadu membránových receptorů a mají přímý vliv na neuronální excitabilitu. Neurosteroidy allo- pregnanolon (allo-PA) a pregnanolon (PA) jsou silné pozitivní modulátory GABAAR. Cílem této práce bylo zavést aplikační systém a miktrospektrofluorimetrickou metodu měření změn v koncentraci somatického vápníku (tzv. calcium imaging) s využitím senzoru GCaMP a pomocí ní otestovat vliv PA na aktivitu primárních hipokampálních kultur. Zavedli jsme aplikační systém a otestovali vápníkový senzor GCaMP in vitro. Aplikace PA inhibovala spontánní vápníkové vrcholy, což souhlasí s jeho známým účinkem na GABAAR. Zjistili jsme, že při opakované aplikaci neurosteroidu došlo ke změně jeho inhibičního účinku na aktivitu neuronální sítě. Naše výsledky naznačují, že při dlouhodobém či opakovaném vystavení neuronů PA může docházet k určitým kompenzačním mechanismům na úrovni GABAAR. Klíčová slova: GABAAR; neurosteroid; pregnanolon; allopregnanolon; vápník; GCaMP; inhibice
|
|
|
Interakce steroidu s NMDA receptorem: Strukturně-aktivitní studie a vliv na mutované lidské formy NMDA receptorů
Krausová, Barbora ; Vyklický, Ladislav (vedoucí práce) ; Anděrová, Miroslava (oponent) ; Tureček, Rostislav (oponent)
N-metyl-D-aspartátové (NMDA) receptory jsou glutamátem aktivované iontové kanály propustné pro vápníkové ionty, které hrají klíčovou roli při excitačním synaptickém přenosu a plasticitě a jejich dysfunkce se podílí na patologii řady neuropsychiatrických onemocnění. Nadměrná aktivace NMDA receptorů prostřednictvím tonicky zvýšené hladiny glutamátu v okolí neuronů může vést k excitotoxicitě, spojené s různými akutními a chronickými neurologickými poruchami, jako je například ischemie, Alzheimerova a Parkinsonova choroba, epilepsie nebo deprese. Naproti tomu, v případě hypofunkce NMDA receptorů se předpokládá, že může být podkladem pro poruchy autistického spektra, schizofrenii, či mentální retardaci. Nedávná analýza DNA u neurologických a psychiatrických pacientů odhalila četné mutace v genech kódujících podjednotky NMDA receptorů. Aktivita NMDA receptorů je ovlivněna širokou škálou alosterických modulátorů, včetně neurosteroidů, které mohou jak inhibovat, tak potencovat aktivitu NMDA receptorů, což z nich činí slibný terapeutický cíl. V této dizertační práci popisujeme nové skupiny neurosteroidních analogů, které mají strukturní modifikace na uhlících v pozici C3 a C17 steroidního jádra, a analogy postrádající D-kruh (perhydrofenanthreny). Hodnotili jsme vztah mezi strukturou a aktivitou (SAR, z...
|
host ::
RSS.